Fosforüülimise modifikatsioon
Fosforüülitud valkude ja peptiidide uurimine võib aidata inimestel selgitada ülaltoodud protsessi mehhanismi ja paremini mõista elutegevuse olemust. Viimastel aastatel on proteoomika tehnoloogia pideva arenguga üha laiemat tähelepanu pööratud valkude fosforüülimise uurimisele. Paljud looduslikud toksiinid ja patogeenid avaldavad oma mõju ka rakusiseste valkude fosforüülimise seisundi muutmise kaudu.
Fosforüülitud polüpeptiidid viitavad peamiselt Ser, Tyr ja Thr. Jäägi külgahela hüdroksüülrühm on modifitseeritud happelise fosfaatpolüpeptiidiks. Seni hõlmab polüpeptiidide fosforüülimise modifitseerimine peamiselt post{1}}fosforüülimise meetodit ja kahte sünteesimeetodit:
Monomeerimeetodil modifitseerimisel on fosforüülitud aminohapet raske peptiidahelaga kondenseeruda suurema kõrvalahela modifikatsioonirühma poolt põhjustatud steerilise takistuse tõttu ja sellele järgnev aminohappe sisestamine on keerulisem. Eriti kui see sisaldab mitmeid fosforüülimissaidi modifikatsioone, muutub süntees äärmiselt keeruliseks ja lõpptootel on keerukad komponendid, seda on raske eraldada ja selle saagis on äärmiselt madal. Seetõttu, kui peptiidahelas on fosforüülitud mitu saiti, võib kaaluda post-fosforüülimise meetodit. Peamine sünteesiprotsess seisneb märgistatavate aminohapete kõrvalahela kaitserühmade valikulises eemaldamises pärast polüpeptiidi sünteesi lõppu. Tyr'i puhul saab reaktsioonis otse kasutada kaitsmata külgahelatega Thr-aminohappeid. Külgahela kaitserühm 1% TFA/DCM juures Seda saab teatud tingimustel kvantitatiivselt eemaldada. Post{8}}fosforüülimise ajal võib kasutada bisbensüülfosforamidiiti. Tetrasool tekitab fosforamidiidi tetrasooli aktiivse vaheühendi, mis on ühendatud hüdroksüülrühmaga ja seejärel oksüdeeritakse peroksühappe tingimustes, et tekitada reaktsiooni lõpuleviimiseks fosforüülrühm.
- Pakume pSer, pTyr, pThr ja D-pSer, D-pTyr, D-pThr fosforüülimise modifitseerimisteenuseid.
- Samaaegselt saab läbi viia 2 saidi, 3 saidi, 4 saidi ja 5 saidi fosforüülimise modifikatsioonid.
Fosforüülitud peptiidid Sünteetiline korpus (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) oota)
1. Järjestuses on 4 fosforüülimissaiti (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), puhtus on 95% ja valmimistsükkel on 3 nädalat.
